ELISA试剂盒细胞裂解液和组织匀浆液的细节处理

ELISA试剂盒细胞裂解液和组织匀浆液的细节处理

因为酶免ELISA试剂盒只能查看可溶性蛋白的含量，所以应保证一切样本均为澄清的液体，沉积或悬浮物都应离心

去掉。为了保证查看的准确性，保存于-20℃或-80℃的样本*好在1~6个月内查看；4℃保存的样本应在1周内进

行查看。别的，还应保证样本不含NaN3，因为NaN3会按捺HRP的活性，然后致使假阴性的成果。  

一、ELISA试剂盒细胞裂解液的细节处理：  
1. 吸去培养板内的培养基，用胰酶消化细胞，加恰当培养基将细胞从培养板上吹下来。悬浮细胞可省掉。  
2. 收集细胞悬液，1000×g离心10min，弃去培养基，用预冷的PBS润洗3次。  
3. 参与恰当的预冷PBS或细胞裂解液(临用前参与蛋白酶按捺剂)重悬细胞。一般6孔板一个孔的细胞量需求150~

250μL PBS重悬。  
4. 将样品放入-20℃或-80℃，使样品冷冻，再放室温冻住样品，重复冻融几回，使细胞充分裂解。也可将样品进

行超声破碎，以抵达裂解的目的。  
5. 4℃10000×g离心10min，除掉细胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免重复冻融。 

二、酶免ELISA试剂盒组织匀浆液的细节处理：
1. 将组织样本用PBS(0.01M, PH 7.4)冲洗，洗去组织表面残留的血液或杂质。
2. 将组织块称重，记载后剪碎，碎块应尽量小，便于匀浆得更充分
3. 将组织按必定的比例参与预冷的PBS(临用前参与蛋白酶按捺剂)匀浆，匀浆时置于冰上或冰浴中。
4. 罗致匀浆液到离心管，4℃5000×g离心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免重复冻融。