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将构建的真核表达载体转染进HEK293细胞的方法

日期:2024-03-12 19:29
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摘要: 将构建的真核表达载体转染进HEK293细胞的方法 问: 我是新手,我想将一个构建的真核表达载体转染进HEK293细胞中,有人说要先将质粒线性化,也有人说不用,不知道到底应该怎样呢?如果需要线性化,具体怎么操作呢?谢谢了! 答: 要看你的目的,是做瞬时表达还是稳定表达,做稳定表达,为了更好的整合到细胞的基因组上,可将质粒线性化,选择好酶切位点。不酶切直接筛选稳定表达也可以得到结果。293转染效率还是较高的,一般不用稳定筛选。

将构建的真核表达载体转染进HEK293细胞的方法

问:


我是新手,我想将一个构建的真核表达载体转染进HEK293细胞中,有人说要先将质粒线性化,也有人说不用,不知道到底应该怎样呢?如果需要线性化,具体怎么操作呢?谢谢了!


答:


要看你的目的,是做瞬时表达还是稳定表达,做稳定表达,为了更好的整合到细胞的基因组上,可将质粒线性化,选择好酶切位点。不酶切直接筛选稳定表达也可以得到结果。293转染效率还是较高的,一般不用稳定筛选。

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